원심분리튜브는 일부 시료를 분리하거나 상층액 침전물을 분리하는 등 높은 회전속도와 압력을 견딜 수 있는 간단한 튜브이다.한외 여과 원심 분리기 튜브는 내부 튜브와 외부 튜브와 유사한 두 부분으로 구성됩니다.내부 튜브는 특정 분자량을 가진 막입니다.고속 원심분리 중에 분자량이 더 작은 물질은 아래쪽 튜브(즉, 외부 튜브)로 누출되고, 더 큰 분자량을 가진 물질은 위쪽 튜브(즉, 내부 튜브)에 갇히게 됩니다.이것이 한외여과의 원리이며, 시료를 농축하는 데 자주 사용됩니다.
한외여과 원심분리 튜브는 일반적으로 전처리 없이 사용할 수 있지만, 단백질 시료 처리의 경우, 특히 희석된 단백질 용액(< 10ug/ml)의 경우 한외여과막을 사용한 농도 회수율이 정량적이지 않은 경우가 많습니다.PES 소재는 비특이적 흡착을 최소화하지만 일부 단백질, 특히 희석된 경우 문제가 발생할 수 있습니다.비특이적 결합 정도는 개별 단백질의 구조에 따라 다릅니다.하전된 도메인이나 소수성 도메인을 포함하는 단백질은 다른 표면에 비가역적으로 결합할 가능성이 더 높습니다.한외여과 원심분리관 표면의 부동태화 전처리는 막 표면의 단백질 흡착 손실을 줄일 수 있습니다.대부분의 경우, 희석된 단백질 용액을 농축하기 전에 컬럼을 전처리하면 막과 표면에 노출된 공백 단백질 흡착 부위를 용액으로 채울 수 있기 때문에 회수율을 향상시킬 수 있습니다.부동태화 방법은 더 많은 양의 부동태화 용액에 컬럼을 1시간 이상 미리 담근 후 증류수로 컬럼을 충분히 세척한 후 증류수로 1회 원심분리하여 필름에 남아 있을 수 있는 부동태화 용액을 완전히 제거하는 방법입니다. .패시베이션 후 필름이 건조되지 않도록 주의하십시오.나중에 사용하려면 멸균 증류수를 넣어 필름을 촉촉하게 유지해야 합니다.
한외여과 원심분리 튜브는 일반적으로 멸균하거나 재사용할 수 없습니다.튜브 하나의 가격이 저렴하지 않기 때문에 재사용하려는 사람들이 많습니다. 증류수로 멤브레인 표면을 여러 번 세척하고 한두 번 원심분리하는 것이 경험입니다.역방향으로 원심분리할 수 있는 작은 튜브는 증류수에 담근 다음 역방향으로 더 여러 번 원심분리하면 더 좋습니다.동일한 시료에 반복적으로 사용할 수 있으며, 사용하지 않을 때는 증류수에 담가둘 수 있으나 세균 오염을 방지해야 합니다.서로 다른 샘플을 혼합하지 마십시오.어떤 사람들은 20% 알코올과 1n NaOH(수산화나트륨)에 담그면 박테리아의 성장을 막고 건조를 방지할 수 있다고 말합니다.한외 여과막이 물에 침투하는 한 건조가 허용되지 않습니다.그러나 다른 사람들은 막 구조를 파괴할 것이라고 말합니다.어쨌든 제조업체는 일반적으로 재사용을 지원하지 않습니다.반복적으로 사용하면 필터막의 기공 크기가 막히고 액체 누출이 발생하여 실험 결과에 영향을 미칠 수 있습니다.
게시 시간: 2022년 9월 5일